一、孩子学不好数学的原因
孩子自身不努力：有些孩子聪明但不愿努力，上课坐不住、不听讲，课后不写作业，难以学好数学。家长和老师以“看管”“打骂”为主，反而适得其反，关键是让孩子意识到学习数学的意义和乐趣，建立主动学习的意识和良好习惯。
未受科学启蒙教育：数学启蒙教育不到位影响深远，好的启蒙教育是教孩子理解基础概念、建立认识、健全框架，而非划知识点、死记硬背。例如讲“垂直”概念，应让孩子真正理解，再记定义就轻松且能活学活用。从小死记硬背的孩子在学习某阶段会进入死胡同，效率降低，此时应从理解概念入手。
家长关注度不够：部分家长因忙或其他原因，平时不关注孩子学习和成长，孩子可能学习不好且出现心理问题，如调皮捣蛋、过分内向或生活态度漠然等。这类学生最需要关怀，老师应伸出援手，与家长沟通，让孩子有完整童年，帮助他们走出困境，建立良好学习和生活态度。
二、全基因合成方法
全基因合成简介：全基因合成是在体外利用人工方法合成双链 DNA 分子的技术，无需模板，是获取基因的重要手段，主要应用于克隆不易获取模板的基因、新基因及异源基因表达等，常在密码子优化后进行。
常见合成方法：
重叠延伸 PCR（OE-PCR）法：设计合成相互重叠的单链寡核苷酸，通过重叠延伸 PCR 法拼接出全长。
双不对称 PCR（DA-PCR）法：常见合成方法之一。
聚合酶连反应（PCR）法：基本原理是基于一定重叠的短引物通过聚合酶逐渐延伸成长片段。
连接酶链反应（LCR）法：也是全基因合成的方法之一。
热力学平衡由内向外（TBIO）法：一种有效的合成方法。
PCR 介导两步（PTDS）法：用于全基因合成。
让公司合成的优势与不足：
优势：只需提供 DNA 序列信息，DNA 合成公司会合成 dsDNA 并克隆在通用载体上，还提供测序信息，确保合成正确性，简单省事，且现在全基因合成十分廉价。
不足：合成慢，一般需 1 2 周，特殊序列可能周期更长；不自由，提供的一般是携带目标基因的重组载体，拿到后需酶切，基因内部含酶切位点还需避开；用于异源基因表达构建突变体时，不如自己合成方便，自己合成只需将包含突变的引物替换即可同时获得各类突变体。
自己合成的方法：
基于“搭桥”PCR 的一次拼接法：依赖引物间相互退火，先将全基因序列打断为不大于 59bp 的短 oligos，靠 3'末端互补序列相互退火，形成带有 gaps 的双链产物，再由 DNA 聚合酶补齐 gaps，形成带有切刻的 DNA 双链，经 Taq DNA Ligase 链接形成完整双链产物，以此为模板或直接用带有切刻的 DNA 双链进行 PCR 扩增得到目标基因。
基于逐渐延伸的 step by step 法：仅最后一条引物为反向，其余均为正向，正向引物间具有重叠序列，通过引物间相互退火、延长合成全长序列，理论上一次 PCR 循环只能延伸一条引物，N 条 oligos 至少需要 N 个 PCR 循环，引物设计比方法 1 简单，引物数目不需要必须为偶数。
全基因合成的相关工具及使用：
OPTIMIZER：优秀的在线设计工具，集密码子优化和全基因合成于一身，但生成的 oligo 只能是 5 的整倍，不检查引物条数，最后一条可能形成错配，可通过再设计额外全长引物弥补，目前打不开。
DNA Works：来源于《Nucleic Acids Research》，论文连接失效，不太好用，参数多较复杂。
Gene2oligo：来源于《Nucleic Acids Research》，设计的引物间无空隙，论文连接失效，可自行编写的工具，包括密码子分析与优化、将基因自动转化为 oligos 及生成参考实验方案三个功能，生成的 oligos 可一键复制导入 SnapGene，程序输出的引物可被 SnapGene 识别。
全基因合成的具体步骤：
设计 PCR 引物：可借助自动设计工具或人工设计，人工设计推荐使用 SnapGene，将全基因序列复制进去，调出“Preferences”面板，设置 3’端最短匹配长度和最低 Tm，引物长度预设为 59bp，重点设计重叠区，根据重叠区 Tm 确定，不同重叠区之间 Tm 平衡很重要，针对方法一引物数目必须是偶数，针对方法二从序列开头或末尾开始拉引物即可。
PCR 获得全长产物：一般需要两轮 PCR，第一轮加入少量引物（50uL 体系中 0.5 1pmol/个 oligo），10 15 个循环获得全长模板，本轮推荐使用缺失 3’ 5’和 5’ 3’外切酶活性的 DNA 聚合酶，第二轮取 1uL PCR 产物做模板，加入 20pmol 全长上下游引物，20 25 个循环获得目标基因，本轮应使用高保真 DNA 聚合酶。
克隆至表达载体：通过同源重组、酶切链接等方法将目标基因插入载体中，转化大肠杆菌或其他宿主感受态细胞，获取单克隆子，全基因合成前要针对克隆/表达载体设计好同源臂或酶切位点，直接加在全基因序列上，否则需单独设计引物添加。
测序鉴定：菌体 PCR 鉴定阳性克隆子并挑选测序，正确的克隆可用于下游表达和纯化。
三、目前人类对人类基因的了解程度
人类基因图谱的进展：2000 年 6 月 26 日宣布人类基因工作草图，反映几万条片段链情况需进一步“拼接”；今年 2 月 12 日公布的人类基因组图谱反映几千条片段链情形，离 46 条完整长链的最终目标越来越近，反映出人类基因图谱更清晰、更准确。
科研成果的主要发现：
人类遗传基因数量比原先估计少很多，约 3 万至 4 万个蛋白编码基因，仅是果蝇基因数目的两倍，但性状更复杂，表明基因组环境因素起重要作用。
基因分布不均匀，部分区域基因密集，部分区域基因“贫瘠”。
35.3％的基因包含重复序列，原来被认为是“垃圾”的 DNA 也起重要作用，应进一步研究。
人类 99.9％的基因密码相同，差异不到 0.1％，这些差异由“单一核苷酸多样性”（SNP）产生，构成不同个体遗传基础，是产生遗传疾病的原因。
关于人类基因数量的争议：国际人类基因组科研小组和塞莱拉公司得出的人类基因数量不同，主要原因是两家科研小组采用不同的基因组测序与分析方法，且计算机预测编码蛋白质基因的准确率有限，各科研小组对测序等问题理解不同，导致研究结果有差异，但公私两家机构数据均在误差范围内，有极高科学价值，且不能推翻“人类有 10 万个基因”的说法，目前数据是从 DNA 水平得出，“人类有 10 万多个基因”是从 RNA 水平得出的结论。
基因图谱的后续作用：两大科研小组的成果对下一步人类基因研究帮助重大，使对人类基因的了解更深入，是认识过程的提高。掌握基因图谱有助于缩短疾病诊断时间，例如找到导致乳腺癌的基因可能从 10 年缩短至 1 年，还能帮助科学家找到治病新药，目前科研人员可在网页上查找两大公司公开的人类基因库信息，私营企业塞莱拉公司对非赢利性组织科研人员免费查询其基因库信息并提供生物信息分析工具，对赢利性组织科研人员收费。
基因歧视问题及应对：人类基因组研究可能带来基因歧视问题，如在就业、医疗保险等方面实施歧视，公众对基因科学了解越多、接受程度越高，恐惧感越少，越能科学对待基因问题，政府需制定规章管理基因信息使用，同时公众对生命科学进程的责任感增强，能促进生命科学向纵深发展，造福人类。
中国基因研究的建议：国外已获或申请专利的基因数目众多，中国科研人员应针对国情，分析中国人基因组差异性，先研究与中国人群易患疾病相关的基因，再瞄准国际疑难病进行研究，形成自己的知识产权，为中国制药公司铺路，使基因技术造福中国和全人类。
